就颜色而言，除了少数品种，毛蜘蛛是雌雄同色，就体型而言，雌蜘蛛略大于雄蜘蛛，但有些品种差距较大，要分辨蜘蛛的公母，须等到蜘蛛长到成体或半成体之后较容易分辨。
就颜色而言，除了少数品种，毛蜘蛛是雌雄同色，就体型而言，雌蜘蛛略大于雄蜘蛛，但有些品种差距较大，要分辨蜘蛛的公母，须等到蜘蛛长到成体或半成体之后较容易分辨，蜘蛛腹部有两对书肺，前面一对书肺的中间有一条略为下陷的横纹，称作胃外沟，喂外沟前方则是生殖器的开口，雄蛛及未成熟的雌蛛生殖口的构造不明显，成熟雌蛛的生殖口则特化成较硬的构造，称作外雌器，虽是如此，但仍不易分辨，但从蜘蛛的脱壳上就能清楚的看出其分别，最准确的判定是雄蛛在成熟后，它毒牙旁的触肢末端，会有一个精栓，且第一对步脚的胫节上会有一根小凸起物，雌蛛则无这两个构造。